液相色谱系列LC08丨HPLC进样器,推推拉拉的江湖传奇
液相色谱系列LC08丨HPLC进样器,推推拉拉的江湖传奇
500 学员 |
学时: 5min |
课程数: 一节课 |
视频: 一个视频 |
色谱学堂 |
现在,自动进样器基本都已经普及了。
只要把样品小瓶摆上去,设好序列,点击开始,
你就可以逃离实验室这个充满各种挥发性有机溶剂的危险地方。
中间时不时地过来瞅瞅,等到差不多时间过来拿报告就可以了。
它的出现,终于解放了守在仪器边彻夜进样的万千实验员们。
不过要说自动进样器,还是得从手动进样器说起。
——————————————–【手动进样器】——————————————–
手动进样器的六通阀里有一个定子和一个转子。
定子上有六个孔,转子上有三道或两道槽,
把它们两个贴在一起,三道槽将六个孔两两联通。
叫转子自然是可以转的,当转子转动60度,
流路就会在Load和Inject这两种状态来回切换。
在Load状态下,
从泵过来的流动相不经过样品环,直接进入到色谱柱。
进样针可以插入进样阀,将样品打入样品环。
当转到Inject状态时,
流动相经过样品环,将样品带入到色谱柱。
——————————————–【自动进样器】——————————————–
沿着手动进样器的思路,
如果我们要做一个自动进样器,应该怎么做呢?
第一,不能再让人用手去掰进样阀了,需要用一个马达,
按照程序要求来转动进样阀,自动切换流路。
第二,需要用一种自动的手段把小瓶里的样品转移到样品环里面。
——————————————–【拉拉派】——————————————–
最早的进样器是通过在废液口连接一个注射器来实现的。
样品盘把小瓶转动到取样针下面,
由注射器往回抽取样品到样品环内。
接着马达带动六通阀转动,样品就被流动相带到色谱柱了。
我们姑且把这种设计称为”拉拉派”,
因为样品其实是被注射器拉入到样品环里面的。
仔细一看,拉拉派其实有不少缺陷:
首先,管路很长,浪费样品。
其次,要将这么长的管路和取样针清洗干净,可不容易,
需要比较复杂的洗针程序。
另外,只能进行满环进样,要更改进样体积,只能更换样品环。
——————————————–【推推派】——————————————–
然后又有了第二种自动进样器,
它将取样针和注射器结合到一起,
通过计量泵带动针杆来取得精确量的样品,
取样以后,针回到六通阀处,
直接扎入到样品孔,将样品推入到样品环。
我们把这个起名叫”推推派“。
推推派的好处是:
管路紧凑,样品不浪费,所以可以用于样品量很少的进样。
另外,样品可以全部转移到样品环,
相对来讲,洗针的压力较小。
推推派可以满环进样,也可以用计量泵来控制体积。
这两种进样方式设计原理都很直接易懂,
也是最被广泛采用的进样方式。
——————————————–【集成派】——————————————–
除了推推拉拉派,还有一个大门派,就是”集成派”。
在设计上,集成派最大的特点,
就是把样品环和进样针都集成到整个六通阀的流路上。
这样进样以后,
流动相持续的冲洗样品环、进样针和针座,
减小了交叉污染的可能性。
当整个流路处于主路的时候,
流动相经过计量泵、样品环、针和针座然后回到六通阀,
最后出去进入色谱柱。
这是在不进样时,处于的自然状态,
绝大多数时候,它也是处于这个状态。
当整个流路处于旁路的时候,
泵过来的流动相直接就进入了色谱柱,
流路其他部分处于静止状态。
在这个状态下,样品针可以抬起来,
等着机械手臂把样品瓶放到针下面来,
接下来由计量泵带动活塞杆,进行取样工作。
取样后,六通阀再次切换到主路状态,
样品被流动相带入到系统,往色谱柱方向去了。
集成派很大程度上解决了样品残留问题,
因为进样以后,自动进样器一直处于主路状态,
也就是说计量泵、样品环、进样针和针座
都一直处于流动相的不断冲洗之下,
直到下一次再进样。
但是,这个门派也会碰到一些新的问题:
比如针和针座的连接,是通过密封圈来密封,
长期处于高压下,对密封性的要求很高,
长时间使用会导致密封磨损,成本相对也会高一些。
另外,进样量受到限制,一般来说样品环都不超过100ul。
总的来说,现在集成派已经有一通天下的趋势了,
连之前的一些另类派都叛变过来了。
同学们,观察一下你的仪器,是属于哪个门派的呢?
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关于教员
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一栗菜籽
一栗菜籽 – :
这是原创吗? 我貌似看过一样的了!!!!!
chromclass
chromclass – :
视频是我们原创哦~你在哪里看到一样的呢?有可能是我们以前发的文章哦~
keowang
keowang – :
推推派的
yqcheng
yqcheng – :
“拉拉派”不是只能满环进样。他可以满环进样,也可以通过注射泵控制实现不同进样体积的精确进样。比如waters ACQUITY UPLC的进样器,spark进样器等。