液相色谱系列LC01丨从Chrom到Chromatography

 

 

色谱学堂GC系列带大家了解了气相色谱，

这个全新的系列会和大家聊聊液相色谱。

HPLC的全称是高效液相色谱，

High Performance Liquid Chromatography。

其中，Chromatography的词根Chrom

在古希腊语中是颜色的意思。

如果你用过戴安，

也就是现在的Thermofisher赛默飞公司的变色龙软件

(Chromeleon)，

你就会发现，

他们使用了相同的词根Chrom。

而我们色谱学堂，ChromClass，

也同样使用了Chrom这个词根。

色谱（Chromatography）的本意是

印有标准颜色和名称的色表，

就像这幅图一样，

但是一种化学分析的方法怎么会得到这样的名字呢？

这得从色谱技术的起源说起。

100多年前，德国科学家费德里希Christian Friedrich

第一次描述了采用滤纸来进行定性分析。

进而在1906年，

俄国的植物学家茨维特 MikhailTsvet利用碳酸钙作为基质，

石油醚作为流动相，成功分离了叶绿素和胡萝卜素，

它们分离后呈现出不同颜色的条带。

因此茨维特把这种分离技术取名为色谱。

现代的色谱技术有很多种，

最常用的是气相色谱和液相色谱。

其中，气相是通过温度和载气的作用，

将样品变为气态，在色谱柱中运动起来。

但有的样品沸点太高，或者加热就分解，

气相就不合适了，

这时候，可以选择用液相色谱来分析。

液相色谱一般由四个部分组成，

分别是

泵Pump，

把流动相连续、稳定的注入系统，

提供稳定的推动力。

进样器Sampler，负责把液体样品引入系统。

色谱柱Column，样品在其上实现分离。

检测器Detector，负责检测从色谱柱出来的样品。

气相色谱的推动力来自于载气。

而液相色谱的样品是被流动相溶解和推动的。

对于气相来说，载气只有氮气，氦气，氢气等有限的几种，

而在液相中，流动相可以有很多选择，

并且不同种类，不同pH值，不同比例等等，

对分析的效果也会有很大影响。

样品通过进样器进样，

可以选择手动进样，或者自动进样。

根据方法需要，

还可以使用控温的自动进样器，

得到更加稳定的结果。

接着，流动相带动着样品进入色谱柱。

色谱柱是液相分离的核心，

通常来说，越长的柱子意味着越高的柱效，

越短的柱子意味着越快的分离。

直径越大意味着更大的容量，

直径越小灵敏度越高。

样品在色谱柱中分离之后，

进入检测器，

将化学的信号转化为电信号。

最常用的是紫外，荧光这类光学检测器，

也可以使用质谱检测器。

光学检测器的好处是不破坏样品，

也就是说，从一个检测器出来之后，

样品可以完好无损的进入下一种检测器。

比如先接紫外检测器，

再接质谱检测器，

就可以同时获得光谱和质谱的信息。

所有的信息最终被色谱数据处理系统，

也就是CDS记录和收集。

CDS系统不仅收集数据，

还负责控制整个采集和分析的过程。

液相色谱又分为很多种，

最常用的是反相液相色谱，

可是，它为什么叫反相液相色谱呢？

我们下一期接着聊，

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